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大鼠HAPI,大鼠小膠質(zhì)細胞系HAPI相關(guān)培養(yǎng)

發(fā)布時間:2016-10-12瀏覽:2413次

大鼠HAPI,大鼠小膠質(zhì)細胞系HAPI相關(guān)培養(yǎng)

產(chǎn)品名稱:小膠質(zhì)細胞HAPI

細胞形態(tài):上皮細胞樣

組織來源:大鼠

傳代情況:P3-P5

存儲條件:90%FBS+10%DMSO

大鼠HAPI,大鼠小膠質(zhì)細胞系HAPI相關(guān)培養(yǎng)

培養(yǎng)條件:IMDM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號12200036),80%;胎牛血清,20%

傳代方法:1:2~1:8傳代;每2~3天換液1次。

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

大鼠HAPI,大鼠小膠質(zhì)細胞系HAPI相關(guān)培養(yǎng)

細胞描述:細胞體呈細長或橢圓,從胞體發(fā)出細長而有分支的突起,表面有許多小棘突。常規(guī)染色見核細長或三角形,染色較深。電鏡下小膠質(zhì)細胞染色深,核扁平或鋸齒狀,胞質(zhì)內(nèi)溶酶體較多。小膠質(zhì)細胞數(shù)量少,約占全部膠質(zhì)細胞的5%。此細胞是定居在腦內(nèi)的吞噬細胞,在炎癥刺激下,其抗原性增強,形態(tài)伸展,功能活躍。小膠質(zhì)細胞在腦內(nèi)各部分均有分布,在灰質(zhì)中的數(shù)量比在白質(zhì)中的多5倍。海馬、嗅葉和基底神經(jīng)節(jié)的小膠質(zhì)細胞比丘腦和下丘腦的多,而腦干與小腦中zui少。

起源于神經(jīng)外胚層。 Ling(1981)的實驗證明,小膠質(zhì)細胞起源于血循環(huán)中的單核細胞,后者進入發(fā)育中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)后轉(zhuǎn)變成具有吞噬能力的阿米巴樣小膠質(zhì)細胞。阿米巴樣小膠質(zhì)細胞在吞噬中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)一些自然退變的殘余物,同時進行繁殖。至中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育完成后,它們變成靜止小膠質(zhì)細胞。當中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷時,靜止小膠質(zhì)細胞被激活成巨噬細胞,與血循環(huán)浸入的單核細胞一齊吞噬碎片和退化變性的髓鞘。當損傷*后,它們又恢復為小膠質(zhì)細胞。在尼氏法與HE染色切片中其形狀常有變異,這主要與其進行運動及吞噬異物有關(guān)。

在細胞增長和產(chǎn)物形成過程中,每間隔一段時間,從中取出部分培養(yǎng)物,再用新的培養(yǎng)液補足到原有體積,使反應器內(nèi)的總體積不變。 這種類型的操作是將細胞接種一定體積的培養(yǎng)基,讓其生長至一定的密度,在細胞生長至zui大密度之前,用新鮮的培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物,每次稀釋反應器培養(yǎng)體積的1/2~3/4,以維持細胞的指數(shù)生長狀態(tài),隨著稀釋率的增加培養(yǎng)體積逐步增加?;蛘咴诩毎鲩L和產(chǎn)物形成過程中,每隔一定時間,定期取出部分培養(yǎng)物,或是條件培養(yǎng)基,或是連同細胞、載體一起取出,然后補加細胞或載體,或是新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)進行培養(yǎng)的一種操作模式。剩余的培養(yǎng)物可作為種子,繼續(xù)培養(yǎng),從而可維持反復培養(yǎng),而無需反應器的清洗、消毒等一系列復雜的操作。在半連續(xù)式操作中由于細胞適應了生物反應器的培養(yǎng)環(huán)境和相當高的接種量,經(jīng)過幾次的稀釋、換液培養(yǎng)過程,細胞密度常常會提高

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